Pathogenetic mechanisms and genotype phenotype correlations in nemaline myopathies and related disorders caused by mutations in tropomyosin genes and nebulin

Show simple item record

dc.contributor Helsingin yliopisto, bio- ja ympäristötieteellinen tiedekunta, biotieteiden laitos fi
dc.contributor Helsingfors universitet, bio- och miljövetenskapliga fakulteten, biovetenskapliga institutionen sv
dc.contributor University of Helsinki, Faculty of Biological and Environmental Sciences, Department of Biosciences en
dc.contributor Folkhälsan Institute of Genetics and Department of Medical Genetics en
dc.contributor.author Marttila, Minttu
dc.date.accessioned 2014-10-28T10:34:17Z
dc.date.available 2014-10-28 fi
dc.date.available 2014-10-28T10:34:17Z
dc.date.issued 2014-11-07
dc.identifier.uri URN:ISBN:978-951-51-0288-1 fi
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10138/136363
dc.description.abstract We collected all mutations in TPM2 and TPM3 genes hitherto found to cause congenital myopathies, to perform genotype-phenotype correlations, and to increase our understanding of the pathogenetic mechanisms of congenital myopathies caused by mutations in the tropomyosin and nebulin genes. Nemaline myopathy (NM), a rare, genetic muscle disorder defined on the basis of muscle dysfunction and the presence of structural abnormalities in the muscle fibres (i.e. nemaline bodies), is caused by mutations in ten genes known to date: Nebulin (NEB), α-actin (ACTA1), α-tropomyosin (TPM3), β-tropomyosin (TPM2), troponin T (TNNT1), cofilin 2 (CFL2), KBTBD13, KLHL40, KLHL41 and leiomodin 3 (LMOD 3). Tropomyosin controls muscle contraction by inhibiting the actin myosin interaction in a calcium-sensitive manner. Mutations in tropomyosin genes may cause NM, cap myopathy, congenital fibre-type disproportion, distal arthrogryposes and Escobar syndrome. We correlated the clinical picture of these diseases to novel and previously published mutations to the TPM2 (30 mutations) and TPM3 (20 mutations) genes. Mutations in TPM2 and TPM3 caused an increased Ca2+ sensitivity, resulting in a hypercontractile molecular phenotype. We studied the pathogenetic mechanisms to which five disease-causing mutations in β-tropomyosin (p.Glu41Lys, p.Lys49del, p.Glu117Lys, p.Glu139del and p.Gln147Pro) lead. We showed that four of the mutations cause changes in the affinity for actin leading to muscle weakness in patients, while two mutations show defective Ca2+ activation of contractility. Nebulin (NEB) is a giant 600 900-kDa filamentous protein in thin filament. We produced four wild-type nebulin super-repeats and five corresponding mutation constructs (p.Glu2431Lys, p.Ser4665Ile, p.Thr5681Pro, p.Arg2478_Asp2512del and p.Val3681_Asn3686del) in the study. The mutations were identified in patients with NM or distal myopathy. We performed F-actin and tropomyosin-binding experiments for the nebulin fragments. Our results demonstrate actin nebulin interactions and, for the first time, tropomyosin nebulin interactions in vitro, and show that the interactions are altered by disease-causing mutations. This suggests that an abnormal interaction between aberrant thin filament proteins is a pathogenetic mechanism in NM and related disorders. en
dc.description.abstract Väitöskirjatyön tavoitteena oli kerätä kaikki tähän mennessä tunnetut mutaatiot TPM2 ja TPM3 geeneistä, jotka aiheuttavat synnynnäisiä myopatioita, tehdä genotyyppi-fenotyyppi-korrelaatioita sekä toiminnallista analyysiä proteiineilla selvittääksemme taudin patogeneesia. Nemaliinimyopatia (NM) on harvinainen geneettinen lihassairaus jonka oireita ovat lihaksen toiminnan häiriöt ja lihassyiden rakenteelliset poikkeavuudet, niin sanotut nemaliinikappaleet. NM:aa aiheuttavat mutaatiot kymmenessä geenissä: nebuliini (NEB), aktiini (ACTA1), α-tropomyosiini (TPM3), β-tropomyosiini (TPM2), troponiini T (TNNT1), kofiliini 2 (CFL2), KBTBD13, KLHL40, KLHL41 ja leiomodiini 3 (LMOD 3). Tropomyosiini osallistuu lihassupistukseen säätelemällä aktiinin ja myosiinin sitoutumista toisiinsa. Mutaatiot tropomyosiinigeeneissä voivat aiheuttaa NM:aa, cap-myopatiaa, syy-tyyppi-epäsuhtaa, distaalista artrogrypoosia ja Escobarin oireyhtymää. Olemme verranneet sairauksien kliinistä kirjoa sekä uusia ja tunnettuja mutaatioita TPM2 ja TPM3 geeneissä. Mukana on 30 mutaatiota TPM2- ja 20 mutaatiota TPM3- geeneistä. Useimmat mutaatiot ovat heterotsygoottisia muutoksia, jotka aiheuttavat autosomaalisen dominantin taudin. TPM2 ja TPM3 mutaatiot voivat aiheuttaa kohonnutta Ca2+ herkkyyttä aiheuttaen hyperkontraktiilin molekulaarisen fenotyypin. Tutkimme viiden β-tropomyosiini-mutaation (p.Glu41Lys, p.Lys49del, p.Glu117Lys, p.Glu139del ja p.Gln147Pro) aiheuttamaa patogeneesia. Näytimme, että neljä mutaatiota muuttaa tropomyosiinin sitoutumista aktiiniin, joka on aiheuttanut näiden potilaiden lihasheikkouden. Mutaatiot p.Glu41Lys, p.Glu117Lys aiheuttavat häiriön Ca2+ aktivoimassa lihassupistuksessa. Nebuliini on noin 600-900 kDa ohuen filamentin proteiini. Olemme tuottaneet villityypin (vt) nebuliinin toistoajaksoja (283-347 amino happoa) ja viisi vastaavaa mutanttia (p.Glu2431Lys, p.Ser4665Ile, p.Thr5681Pro, p.Arg2478_Asp2512del ja p.Val3681_Asn3686del). Mutaatiot aiheuttavat NM:aa tai distaalistamyopatiaa. Teimme F-aktiini-nebuliini-interaktiokokeita ja ensimmäistä kertaa tropomyosiini-nebuliini sitoutumisen in vitro. Mutaatiot sekä tropomyosiinissa että nebuliinissa muuttavat proteiinien sitoutumista toisiinsa. Sitoutumiserot muuntuneiden ohuen filamentin proteiinien välillä ovat patogeneettisia mekanismeja NM:ssa ja sen kaltaisissa myopatioissa. fi
dc.format.mimetype application/pdf fi
dc.language.iso en
dc.publisher Helsingin yliopisto fi
dc.publisher Helsingfors universitet sv
dc.publisher University of Helsinki en
dc.relation.isformatof URN:ISBN:978-951-51-0287-4 fi
dc.relation.isformatof Pitäjänmäki: Yliopistopaino, 2014 fi
dc.rights Julkaisu on tekijänoikeussäännösten alainen. Teosta voi lukea ja tulostaa henkilökohtaista käyttöä varten. Käyttö kaupallisiin tarkoituksiin on kielletty. fi
dc.rights This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited. en
dc.rights Publikationen är skyddad av upphovsrätten. Den får läsas och skrivas ut för personligt bruk. Användning i kommersiellt syfte är förbjuden. sv
dc.subject lääketieteellinen genetiikka fi
dc.title Pathogenetic mechanisms and genotype phenotype correlations in nemaline myopathies and related disorders caused by mutations in tropomyosin genes and nebulin en
dc.type.ontasot Väitöskirja (artikkeli) fi
dc.type.ontasot Doctoral dissertation (article-based) en
dc.type.ontasot Doktorsavhandling (sammanläggning) sv
dc.ths Wallgren-Pettersson, Carina
dc.ths Grönholm, Mikaela
dc.opn Ochala, Julien
dc.type.dcmitype Text

Files in this item

Total number of downloads: Loading...

Files Size Format View
pathogen.pdf 2.810Mb PDF View/Open

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record