The interaction of auxin and cytokinin signalling regulates primary root procambial patterning, xylem cell fate and differentiation in Arabidopsis thaliana

Show full item record

Permalink

http://urn.fi/URN:ISBN:ISBN 978-951-51-1852-3
Title: The interaction of auxin and cytokinin signalling regulates primary root procambial patterning, xylem cell fate and differentiation in Arabidopsis thaliana
Author: Help-Rinta-Rahko, Hanna
Contributor: University of Helsinki, Faculty of Agriculture and Forestry, Department of Agricultural Sciences
Institute of Biotechnology; Faculty of Biosciences, Department of Biological and Environmental Sciences
Thesis level: Doctoral dissertation (article-based)
Belongs to series: YEB - URN:ISSN:ISSN 2342-5431
Abstract: The interaction of auxin and cytokinin signalling regulates primary root procambial patterning, xylem cell fate and differentiation in Arabidopsis thaliana. Plants contribute to the Earth s atmosphere by binding carbon dioxide and releasing oxygen. Trees produce biomass, which is a renewable source of energy. The Arabidopsis root vasculature is a good model system for studying biomass formation, as it contains the same cell types that are also found in trees: xylem, phloem and intervening pluripotent procambial cells. In Arabidopsis thaliana roots, these cells arise from stem cells within the root meristem. The wild type root radial pattern is bisymmetric, and the regulation of xylem formation is controlled by phytohormones, especially auxin and cytokinin. Our findings show that the vascular pattern is set by a symmetry-breaking event during embryogenesis and is initiated by auxin accumulation and signalling at the cotyledon initials. As the embryo grows, the high auxin signalling promotes the expression of AHP6. Upregulation of AHP6 in specific cells leads to inhibition of cytokinin signalling and might be a key factor in symmetry breakage. Mutants with altered cotyledon numbers or altered cotyledon anatomy fail to establish the bisymmetric pattern and often show altered root symmetry. In growing roots, the bisymmetric pattern is actively reinforced by polar auxin transport and long distance cytokinin transport/translocation from the apical parts of the plant. Cytokinin movement via the phloem and unloading at the root apical meristem promotes cytokinin signalling in the procambial cells in the proximal meristem. Both cytokinin and auxin are required during root procambial patterning, and the interaction of these two phytohormones is mutually inhibitory. According to our model (described in the first part of this thesis), auxin signalling is critical for protoxylem identity formation. In turn, the results from the procambial re-patterning experiments (second part of this thesis) show that cytokinin is the key hormone in promoting cell proliferation in the proximal meristem. Epistasis experiments illustrate that a fine balance between these two hormones affects the fate of all vascular cells. We are beginning to understand the complexity and interdependencies of signalling pathway interactions during proximal meristem vascular patterning, yet the temporal aspect is still largely unexplored. In the last part of this thesis, I discuss the role ROS signalling might have in stele patterning and temporal regulation of programmed cell death. While our published GRI-MC9-PRK5 module might not be directly linked to primary root proximal meristem procambial patterning, one cannot exclude the possibility that it might be required in the final stages of protoxylem differentiation or that a similar signalling mechanism could regulate initial stele patterning and meristem growth dynamics. This thesis describes the auxin-cytokinin interaction in vascular initial patterning and the mechanism by which the hormonal signalling domains are maintained in the proximal meristem. The unpublished data demonstrate how procambial cells can be manipulated to generate new tissues by affecting the homeostasis of auxin and cytokinin signalling. The last part of the thesis describes a cell death signalling module and speculates that it (or similar module) might be involved with primary root meristem maturation.Auksiini-sytokiniini-signaloinnin vuorovaikutus Arabidopsis thalianan primääri-juuren johtojänteen solutyyppien identiteetin muodostumisen ja puusolukon erilaistumisen säätelyssä. Kasvit vaikuttavat maapallon ilmakehän koostumukseen sitomalla itseensä hiilidioksidia sekä vapauttamalla happea. Puut tuottavat biomassaa, joka on uusiutuva energianlähde. Puusolukon muodostumista säätelevät kasvihormonit, erityisesti auksiini ja sytokiniini. Arabidopsis thalianan eli lituruohon juuren johtojänne on hyvä malli puunmuodostuksen tutkimiselle, sillä se sisältää samat solutyypit kuin suuremmat puuvartiset kasvit. Nämä keskeiset solutyyppit ovat ksyleemi (puu), nila ja jälsi, joka sijaitsee ksyleemi- ja nilasolujen välissä. Nämä solutyypit kehittyvät lituruohon juurissa kärkikasvupisteiden kantasoluista. Villityypin lituruohon johtojänne on rakenteeltaan bisymmetrinen. Johtojänteen rakenne muodostuu varhain alkiokehityksen aikana, ja juurten symmetria määräytyy verson sirkkalehtien perusteella. Auksiini akkumuloituu sirkkalehtien aiheisiin. Kun alkio kasvaa suuremmaksi, korkea auksiini-pitoisuus edistää AHP6-geenin ekspressiota sirkkalehdissä ja alkion juuren johtojänteessä. Tämä soluspesifinen AHP6 ilmentyminen johtaa sytokiniinisignaloinnin inhibitioon, mikä on kriittistä bisymmetrian muodostumiselle. Mutanteilla joiden sirkkalehtien lukumäärä tai muoto poikkeaa normaalista, on havaittu ongelmia sekä bisymmetrisen rakenteen muodostumisessa alkionkehityksen aikana, että juuren normaalin rakenteen ylläpidossa itämisen jälkeen. Kasvavien juurten rakennetta pidetään aktiivisesti yllä auksiinin ja sytokiniinin kuljetuksella versoista juuriin. Sytokiniinin liikkuminen nilan mahlavirtauksen mukana juurten kärkiin edistää sytokiniinisignalointia kärkikasvupisteen kantasoluissa ja niiden tytärsoluissa. Sekä sytokiniinia että auksiinia tarvitaan johtosolukon erilaistumiseen ja nämä hormonit vaikuttavat toisiinsa inhiboivasti. Esittämämme mallin mukaan (kuvattu ensimmäisessä osiossa) auksiinisignalointi on kriittistä protoksyleemin identiteetin muodostumiselle. Sytokiniini on puolestaan tärkeää juuren kärkikasvupisteen solujen jakautumisen ja erilaistumattomien jälsisolujen identiteetille, kuten tulokset johtojänteen uudelleen-järjestäytymiskokeista osoittavat (väitöskirjan toisessa osuudessa). Näiden kahden hormonin välinen epistasia säätelee kaikkien johtojänteen solujen kehitystä. Tämän väitöskirjan viimeinen osuus keskittyy happiradikaali-signaloinnin ja kontrolloidun solukuoleman rooliin juuren meristeemin kehityksessä. Vaikka julkaisemamme GRI-MC9-PRK5-moduuli ei vaikuta liittyvän kärkikasvupisteen kantasolujen identiteetin ja johtojänteen rakenteen säätelyyn, on mahdollista että sitä tarvitaan protoksyleemin erilaistumisessa myöhemmissä vaiheissa. Väitöskirjan viimeisessä osuudessa spekuloidaan sillä, mikä rooli solukuolemaan liittyvällä signaloinnilla on juuren kärkikasvupisteen kypsymisen säätelyssä. Tämä väitöskirjatyö havainnollistaa auksiini-sytokiniini-vuorovaikutuksen roolia johtojänteen kantasolujen identiteetin muodostumisessa ja mekanismin, jolla hormonisignalointidomeenit vuorovaikuttavat toisiinsa. Tulokset osoittavat, että juuren rakennetta voidaan muuttaa keinotekoisesti manipuloimalla auksiini-sytokiniini hormonisignalointia. Ymmärryksemme eri hormonisignalointireittien monimutkaisuudesta ja niiden välisistä vuorovaikutuksista juuren johtojänteen eri solutyyppien identiteettien muodostumisessa on lisääntynyt merkittävästi viime vuosien aikana, mutta juuren kärkikasvupisteen eri solujen kypsymisen ajallinen säätely kaipaa lisää tutkimusta.
URI: URN:ISBN:ISBN 978-951-51-1852-3
http://hdl.handle.net/10138/160238
Date: 2016-04-22
Subject: plant Molecular and Developmental Biology
Rights: This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.


Files in this item

Total number of downloads: Loading...

Files Size Format View
theinter.pdf 29.86Mb PDF View/Open

This item appears in the following Collection(s)

Show full item record