Sulfiitin määrittäminen perunatuotteista ja perunalajikkeista käänteisfaasi-ionipari-nestekromatografia-post-column-menetelmällä ja pikamääritysmenetelmillä

Show full item record



Permalink

http://urn.fi/URN:NBN:fi:hulib-201704263969
Title: Sulfiitin määrittäminen perunatuotteista ja perunalajikkeista käänteisfaasi-ionipari-nestekromatografia-post-column-menetelmällä ja pikamääritysmenetelmillä
Author: Vänttinen, Kristofer
Contributor: University of Helsinki, Faculty of Agriculture and Forestry, Department of Food and Environmental Sciences
Publisher: Helsingfors universitet
Date: 2017
Language: fin
URI: http://urn.fi/URN:NBN:fi:hulib-201704263969
http://hdl.handle.net/10138/181466
Thesis level: master's thesis
Discipline: Livsmedelskemi
Food Chemistry
Elintarvikekemia
Abstract: Peruna (Solanum tuberosum L.) on hyötykasvi, joka kuuluu koisokasveihin (Solanaeceae). Perunan mukulassa esiintyy entsymaattista ruskistumista, kun sitä kuoritaan tai se vaurioituu. Polyfenolioksidaasi katalysoi fenolisten yhdisteiden (esim. klorogeenihappo ja tyrosiini) reaktioita o-kinoneiksi. Kun kinonit polymerisoituvat, syntyy niistä melamiineja, joista ruskea väri johtuu. Sulfiitteja käytetään lisäaineina estämään perunan entsymaattisia ruskistumisreaktioita. Sulfiittien enimmäismäärät Euroopan unionissa ovat 50 mg SO2/kg kuoritulle perunalle, 100 mg SO2/kg jäähdytetylle ja pakastetulle perunalle ja 400 mg SO2/kg kuivatetuille perunatuotteille (N:o 1333/2008). Sulfiitin allergiamerkintäraja on 10 mg SO2/kg (N:o 1169/2011). Tämän tutkimuksen tavoitteina oli 1) selvittää erilaisten kaupallisten perunavalmisteiden sulfiittipitoisuuksia, 2) tutkia sulfiitin sitoutumista perunan pintaan lämpötilan, ajan ja pitoisuuden funktiona, 3) tutkia sulfiittipitoisuuksia eri perunalajikkeissa ja 4) vertailla sulfiittipitoisuuksien HPLC-tuloksia pikamääritysmenetelmien tuloksiin. Kirjallisuusosion tavoitteina oli selvittää perunan käyttöä elintarvikkeena, kuorimoteollisuuden tuotantotapoja, entsymaattisia ruskistumisreaktioita sekä sulfiitteja ja niiden analyysimenetelmiä. Tässä tutkimuksessa oli käytössä muunneltu käänteisfaasi-ioniparinestekromatografiamenetelmä. Pikamääritys- menetelminä tutkimuksessa oli käytössä Merck MQuantTM Sulfite Test ja Neogen ALERT® for Sulphites in Seafood. Tutkimuksessa selvitettiin 18 kaupallisen näytteen (kuusi perunamuusijauhetta, kolme tuoretuotetta ja yhdeksän pakastetta) sulfiittipitoisuudet. Box-Behnken-koesuunnittelun avulla selvitettiin lämpötilan, ajan ja pitoisuuden vaikutus sulfiitin sitoutumiseen perunan pinnalla. Tämän jälkeen sulfiitin sitoutumista tutkittiin yhdeksässä eri perunalajikkeessa (Belana, Nicola, Siikli, Gala, Jelly, Melody, Bellarosa, Afra ja Puikula). Sulfiittia esiintyi neljässä perunamuusijauheessa ja kolmessa tuoretuotteessa. Perunamuusijauhenäytteissä sulfiittipitoisuudet olivat alle enimmäismäärärajojen, mutta yli allergiarajan (10 mg SO2/kg). Sulfiitti oli mainittu pakkausmerkinnöissä. Tuoretuotteissa sulfiittipitoisuus ensimmäisessä tuotteessa oli alle allergiarajan ja toisessa tuotteessa alle enimmäisrajan, mutta kolmannessa tuotteessa enimmäisraja ylittyi. Ensimmäisessä tuotteessa sulfiittia ei oltu mainittu pakkausmerkinnöissä, mutta kahdessa muussa oli. Box-Behnken-koesuunnittelun tulokset analysoitiin yksisuuntaisella varianssianalyysilla. Pitoisuudella (%) oli suurin vaikutus sulfiitin sitoutumiseen (p = 0,000), ja sen jälkeen ajalla (s) (p = 0,0079). Lämpötilalla (°C) ei ollut tilastollista merkitsevyyttä (p = 0,3513). Varianssianalyysin tuloksien pohjalta saatiin selville optimaalisin määrityspiste, joka oli 1 %, 60 s ja 5 °C. Kuoritut perunalajikenäytteet sulfiittikäsiteltiin näissä olosuhteissa. Tulokset analysoitiin ensin yksisuuntaisella varianssianalyysilla ja sen jälkeen Tukey HSD -analyysilla. Sulfiittia sitoutui eniten Puikulaan (67,0 ± 8,8 mg SO2/kg) ja vähiten Galaan (19,7 ± 5,3 mg SO2/kg). Suurin ero lajikkeiden välillä sulfiittipitoisuuksissa oli Belanalla, Galalla ja Puikulalla. Jellyllä oli eroavaisuutta vain Galan kanssa. Pikamääritysmenetelmistä ALERT® oli täsmällisempi kuin MQuantTM. ALERT®-menetelmällä pystyttiin analysoimaan sulfiitin pitoisuus suoraan näytteen pinnalla, kun taas MQuantTM vaati 3- tai 5-kertaisen laimennoksen ennen määritystä. Käytetyistä menetelmistä HPLC-menetelmä oli luotettavin, mutta ALERT® soveltui hyvin semikvantitatiiviseksi pikamääritysmenetelmäksi. MQuantTM ei tutkimuksen perusteella sovellu sulfiitin määrittämiseen perunatuotteista.Potato (Solanum tuberosum L.) is a plant that belongs to the group of nightshades (Solanaeceae). Enzymatic browning occurs in potato tuber when it is peeled or bruised. Polyphenols in tuber (e.g. chlorogenic acid and tyrosine) are oxidised into o-kinones by polyphenol oxidase. When kinones polymerise, melanins are formed. These compounds cause the brown colour in potato tubers. Sulfites are used as food additives in potatoes preventing enzymatic browning reactions. The maximum permitted usage levels in European Union are 50 mg SO2/kg in peeled potatoes, 100 mg SO2/kg in cooled and frozen potatoes and 400 mg SO2/kg in dried potato products (No 1333/2008). The allergy threshold limit for sulfites in food products is 10 mg SO2/kg (No 1169/2011). The objectives of this study were 1) to determine the sulfite content in various potato products on the market, 2) to examine the binding of sulfite on potato in the relation with temperature, time and concentration, 3) to examine sulfite content in different potato varieties and 4) to compare the HPLC results with the rapid determination methods. The objectives in the literature review were to study the use of a potato as a food component, industrial peeling of potatoes, enzymatic browning reactions, sulfites and their analytical methods. In this study, a modified RP-IP-HPLC-PC (Reversed Phase Ion-Pair High Performance Liquid Chromatography Post-Column) method was used. For rapid determination methods, two kits were used: Merck MQuantTM Sulfite Test and Neogen ALERT® for Sulphites in Seafood. 18 food products were selected to this study (6 mashed potato flours, 3 fresh products and 9 frozen). Box-Behnken Experimental Design was carried out prior to the examination of sulfite binding in different potato varieties (Belana, Nicola, Siikli, Gala, Jelly, Melody, Bellarosa, Afra and Puikula). Sulfite was found in four mashed potato flours and three fresh potato products. In flours, the content of sulfites were below the maximum limit, but over the allergy threshold limit (10 mg SO2/kg). However, sulfite was labelled. In fresh products, the content of sulfite in the first product was below the allergy threshold limit, the second product fell under the maximum limit but the third product exceeded it. In the first product sulfite was not labelled but in the other two ones it was. In Box-Behnken Experimental Design, results were analysed with one-way ANOVA. Concentration (%) had the biggest influence on sulfite binding on potato (p = 0,000) and then time (s) (p = 0,0079). Temperature (°C) didn’t have any statistical significance (p = 0,3513). According to the results, the best measurement point was 1 %, 60 s, +5 °C. The peeled potato varieties were sulfite treated in these conditions. Statistical analysis was carried out with one-way ANOVA and then Tukey HSD. According to the results, there was a statistical significance (p = 0,000) in sulfite binding in different potato varieties. Sulfite was bound most in Puikula (67,0 ± 8,8 mg SO2/kg) and least in Gala (19,7 ± 5,3 mg SO2/kg). The most difference within the varieties in sulfite binding were with Belana, Gala and Puikula. Jelly had a difference only with Gala. In rapid determination methods, ALERT® was more accurate than MQuantTM. ALERT® could be applied on the surface of the sample contrary to MQuantTM that needed 3 or 5 times dilution before measurement. ALERT® is a good choice for semiquantitative rapid method. MQuantTM, however, is not suitable for rapid measurement of sulfites in potato products.
Subject: Box-Behnken
RP-IP-HPLC-PC
sulfite
sulphite
potato
potato varieties
potato products
enzymatic browning
sulfiitti
peruna
perunalajikkeet
perunatuotteet
entsymaattinen ruskistuminen


Files in this item

Files Size Format View

There are no files associated with this item.

This item appears in the following Collection(s)

Show full item record