Development of microdevices for proteome research and diagnosis

Show simple item record

dc.contributor.author Demianova, Zuzana
dc.date.accessioned 2010-11-25T11:15:57Z
dc.date.available 2010-11-25T11:15:57Z
dc.date.issued 2009-06-26
dc.identifier.uri URN:ISBN:978-952-10-5621-5 fi
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10138/20160
dc.description.abstract The basic goal of a proteomic microchip is to achieve efficient and sensitive high throughput protein analyses, automatically carrying out several measurements in parallel. A protein microchip would either detect a single protein or a large set of proteins for diagnostic purposes, basic proteome or functional analysis. Such analyses would include e.g. interactomics, general protein expression studies, detecting structural alterations or secondary modifications. Visualization of the results may occur by simple immunoreactions, general or specific labelling, or mass spectrometry. For this purpose we have manufactured chip-based proteome analysis devices that utilize the classical polymer gel electrophoresis technology to run one and two-dimensional gel electrophoresis separations of proteins in just a smaller size. In total, we manufactured three functional prototypes of which one performed a miniaturized one-dimensional gel electrophoresis (1-DE) separation, the second and third preformed two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) separations. These microchips were successfully used to separate and characterize a set of predefined standard proteins, cell and tissue samples. Also, the miniaturized 2-DE (ComPress-2DE) chip presents a novel way of combining the 1st and 2nd dimensional separations, thus avoiding manual handling of the gels, eliminate cross-contamination, and make analyses faster and repeatability better. They all showed the advantages of miniaturization over the commercial devices; such as fast analysis, low sample- and reagent consumption, high sensitivity, high repeatability and inexpensive performance. All these instruments have the potential to be fully automated due to their easy-to-use set-up. en
dc.description.abstract Proteomisten mikrosirujen kehityksen tavoite on tuottaa tehokkaita ja herkkiä mittausmenetelmiä proteiinien laajamittaista analytiikkaa varten. Nämä sirut kykenevät analysoimaan suuren määrän näytteitä rinnakkain nopeasti ja täysin automaattisesti. Proteominen mikrosiru havaitsee joko yksittäisiä proteiinimuutoksia tai sarjan proteiinin yhtäaikaisia muutoksia. Siruja voidaan hyödyntää niin kliinisessä diagnostiikassa kuin myös biokemiallisessa perustutkimuksessa. Biokemiallisessa perustutkimuksessa voimme mitata eri proteiinien interaktioita, ilmentymistä rakennemuutoksia tai sekundaarisia muutoksia, esim fosforylaatiota. Tulosten havaitseminen voidaan toteuttaa yksinkertaisella immunovärjäyksellä, yleisillä tai spesifisillä leimoilla tai massaspektrometrialla. Tätä silmälläpitäen olemme kehittäneet mikrosiruja jotka hyödyntävät klassista yksi (1-DE) ja kaksisuuntaista (2-DE) geelielektroforeesitekniikkaa mutta paljon pienemmässä mittakaavassa kuin nykyisin. Rakensimme kolme prototyyppiä joista yksi käyttää yksisuuntaista - ja kaksi kaksisuuntaista geelielektroforeesia. Näitä mikrosiruja hyödynnettiin erottamaan kuusi eri proteiinia tunnetusta standardiseoksesta, sekä solu - ja kudos näytteille. Siruteknologia soveltui hyvin yksi- ja kaksisuuntaisen elektroforeesin automaattiseen yhdistämiseen samaan laitteeseen mahdollistaen näin puhtaamman näytekäsittelyn, nopean analyysin ja hyvän toistettavuuden, kaikki ominaisuuksia joita nykyinen laiteteknologia ei pysty tarjoamaan. Siruteknologia antaa mahdollisuuden paljon pienempien näytemäärien sekä käyttökemikaalien käytölle säästäen näin tuntuvasti yksittäisen analyysin kustannuksia. Laitteita kokeiltiin lopuksi kahteen kliiniseen näytteeseen joista toisessa erotimme proteiinisokeriketjuvariaatioita diabetes potilaan verestä ja toisessa Alzheimer-potilaan aivonäytteessä ilmenevää hyperfosforyloitua proteiinia. fi
dc.language.iso eng
dc.publisher Helsingin yliopisto fi
dc.publisher Helsingfors universitet sv
dc.publisher University of Helsinki en
dc.relation.isformatof URN:ISBN:978-952-10-5620-8 fi
dc.rights Julkaisu on tekijänoikeussäännösten alainen. Teosta voi lukea ja tulostaa henkilökohtaista käyttöä varten. Käyttö kaupallisiin tarkoituksiin on kielletty. fi
dc.rights This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited. en
dc.rights Publikationen är skyddad av upphovsrätten. Den får läsas och skrivas ut för personligt bruk. Användning i kommersiellt syfte är förbjuden. sv
dc.subject lääketieteellinen biokemia fi
dc.title Development of microdevices for proteome research and diagnosis en
dc.type.ontasot Doctoral dissertation (article-based) en
dc.type.ontasot Artikkeliväitöskirja fi
dc.type.ontasot Artikelavhandling sv
dc.ths Baumann, Marc
dc.ths Franssila, Sami
dc.opn Gutmann, András
dc.type.dcmitype Text
dc.contributor.organization University of Helsinki, Faculty of Medicine, Institute of Biomedicine, Protein Chemistry / Proteomics / Peptide Synthesis and - Array Unit en
dc.contributor.organization Helsingin yliopisto, lääketieteellinen tiedekunta, biolääketieteen laitos fi
dc.contributor.organization Helsingfors universitet, medicinska fakulteten, biomedicinska institutionen sv
dc.type.publication doctoralThesis

Files in this item

Total number of downloads: Loading...

Files Size Format View
developm.pdf 1.577Mb PDF View/Open

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record