CHARACTERIZATION OF ANGPTL3 DEFICIENCY AND MOLECULAR MECHANISMS OF ANGPTL3 DEFICIENCY-INDUCED HYPOLIPIDEMIA

Näytä tavanomaiset kuvailutiedot

dc.contributor Helsingin yliopisto, lääketieteellinen tiedekunta, tutkimusohjelmayksikkö fi
dc.contributor Helsingfors universitet, medicinska fakulteten, forskningsprogramenheten sv
dc.contributor University of Helsinki, Faculty of Medicine, Research Programs Unit, Lääketieteellinen genetiikka, doctoral programme in biomedicine en
dc.contributor.author Tikka, Anna fi
dc.date.accessioned 2017-11-21T06:40:10Z
dc.date.available 2018-01-09 fi
dc.date.available 2017-11-21T06:40:10Z
dc.date.issued 2018-01-19 fi
dc.identifier.uri URN:ISBN:ISBN 978-951-51-3907-8 fi
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10138/228639
dc.description.abstract Johdanto: Väitöstyön tarkoituksena oli tutkia ANGPTL3 puutoksen aiheuttamia muutoksia ihmisessä rasva-aineenvaihdunnan osalta kliinisesti, populaatiotasolla sekä solutasolla. ANGPTL3 proteiinin on osoitettu säätelevän lipoproteiinilipaasin (LPL) toimintaa ja siten osallistuvan maksasta sekä ohutsuolesta syntetisoitujen kolmiarvoisten (triglyseridi, TG) rasvojen poistoon verenkierrosta. ANGPTL3 toiminnan estymiseen vaikuttavat mutaatiot (LOF; loss of function) aiheuttavat familiaaliseen hypolipidemian fenotyypin (FHBL2), jonka pääpiirteenä on matalat veren VLDL, LDL ja HDL lipoproteiinien tasot. Päämenetelmät: Solumalleilla tutkittiin ANGPTL3:n kudosspesifistä toimintamekanismia hiljentämällä ANGPTL3 shRNA-lentivirus vektorilla hepatosyyteissä sekä enterosyyteissä. Tutkittavien lipidien ja proteiinien tasoja mitattiin sekä soluista että solumediasta entsymaattisilla menetelmillä sekä ELISA menetelmillä. Leimattujen substraattien avulla selvitettiin solujen metabolian muutoksia. Geenien ilmentymistä soluissa tutkittiin kvantitatiivisella PCR (qPCR)-analyysillä. Koe-henkilöt, joihin kuului ANGPTL3 LOF kantajia sekä kontrollihenkilöitä nauttivat rasvapitoisen aterian, jonka jälkeen kerätyistä plasmanäytteistä mitattiin lipoproteiinien, rasva-aineenvaihdunnan markkereiden sekä TG:ien, kolesterolin ja fosfolipidien pitoisuuksia. Populaatiotutkimuksessa suomalaisten ANGPTL3 varianttien kantajien lipiditasot määritettiin tarkoituksena selvittää ANGPTL3 varianttien osuutta dyslipidemioissa. Verenkierrossa olevan ANGPTL3-proteiinin konsentraatio mitattiin henkilöiltä, joiden lipidiarvot vastasivat hyper- tai hypolipidemiaa, jonka jälkeen tasoja verrattiin lipidiarvoihin sekä muihin lipidimetabolian biomarkkereihin mahdollisten korrelaatioiden löytämiseksi. Johtopäätökset: Tulosten perusteella ANGPTL3:n ilmentymistä soluissa säätelevät insuliini, PPARy-agonisti rosiglitazone sekä LXR-agonistit. ANGPTL3-hiljennys aiheuttaa VLDL-partikkelien lipidaation laskua hepatosyyteissä insuliini stimuloinnin aikana sekä CD36- ja PLTP-geenien ilmentymistason laskua soluissa. ANGPLT3-LOF kantajien kliinisessä tutkimuksessa havaittiin, että ANGPTL3-puutoksen omaavilla homotsygooteilla LOF kantajilla ei esiintynyt postprandiaalista hyperlipidemiaa, toisin kuin heterotsygooteilla kantajilla ja kontrollihenkilöillä, ja tämän fenotyypin voidaan katsoa olevan ateroskleroosia ehkäisevä tekijä. ANGPTL3 puutos aiheuttaa myös veren rasvahappojen määrän vähenemistä verenkierrossa ja siten mahdollisesti vähentää maksaan päätyvien rasvahappojen määrää ja niiden oksidaatiota. Populaatiotutkimuksessa ANGPTL3-varianttien kantajien osuus oli vähäinen, ja dyslipidemiaa oli havaittavissa yhdellä haitallisen variantin kantajalla. Varianttia ei vähäisen kantajien määrän takia pystytä luotettavasti kausaalisesti yhdistämään fenotyyppien aiheuttajaksi. ANGPTL3:n plasma tasot eivät eronneet hypo- tai hyperlipideemisten henkilöiden välillä, ja täten voidaan todeta, että ANGPTL3:n plasmapitoisuudet eivät toimi hyvänä biomarkkerina ennustettaessa veren lipiditasoja. en
dc.description.abstract ANGPTL3 proteiini osallistuu verenkierrossa rasvojen kulkeutumiseen kudoksiin, säätelemällä lipoproteiinilipaasin toimintaa. ANGPTL3 geenin toiminnan estävät harvinaiset mutaatiot johtavat hyvin mataliin veren rasva-arvoihin. Väitöskirjan ensimmäisessä osajulkaisussa tutkitaan solumalleilla ANGPTL3 geenin toimintaa maksassa sekä ohutsuolen enterosyyteissä, ja esitetään useita geenin toimintaan liittyviä mekanismejä. Väitöskirjan toisessa osajulkaisussa tutkittiin pienen italialaisen Campodimelen kylän ANGPTL3 s17*-mutaation kantajia, jotka matalien rasva-arvojensa lisäksi ovat tunnettuja pitkästä iästään. Koe-asetelmassa s17*mutaation kantajat sekä kontrollihenkilöt nauttivat rasvapitoisen aterian, jonka jälkeen verestä mitattiin rasvametabolian merkkiaineita. Selvisi, että rasva-pitoinen ateria ei nostanut veren triglyseridiarvoja juuri lainkaan mutaation kantajilla, kuten kontrollihenkilöillä, joilla oli selkeästi havaittavissa tyypillinen aterianjälkeinen nousu veren triglyseridi arvoissa. Mutaation kantajilla todettiin myös 50 % alhaisemmat kokonaiskolesterolitasot veressä. Tulosten perusteella voidaan todeta, että ANGPTL3 toiminnan estymisen aiheuttava mutaatio suojelee kantajaansa hyperlipidemialta ruokavaliosta riippumatta. Veren korkeat rasva-arvot ovat merkittävä riskitekijä ateroskleroottisten verisuonitautien synnyssä. ANGPTL3 toiminnan estämiseen tähtäävien lääkeaineiden kehittäminen on edennyt 2017 viimeisen vaiheen (III) kliinisiin kokeisiin. Kliinisten kokeiden perusteella ANGPTL3 toimintaa estävä monoklonaalinen vasta-aine (Evinacumab, Regeneron Pharmaceuticals) laski veren kokonaistriglyseridiarvoja 47±10 %, kokonaiskolestroliarvoja 47±19 % ja LDL-C arvoja 49 ±23 % koe-henkilöissä. Tutkimusten tulosten perusteella ANGPTL3 voi osoittautua toimivaksi vaihtoehtoiseksi strategiaksi hyperlipidemian hoidossa erityisesti potilaille, jotka eivät hyödy olemassa olevista hoidoista. Väitöskirjan kolmannessa osajulkaisussa kartoitetaan populaatiotasolla ANGPTL3 mutaatioiden esiintymistä suomalaisissa, sekä tutkittiin korreloivatko ANGPTL3 veren proteiinitasot veren rasva-arvojen ja muiden säätelytekijöiden kanssa. fi
dc.format.mimetype application/pdf fi
dc.language.iso en fi
dc.publisher Helsingin yliopisto fi
dc.publisher Helsingfors universitet sv
dc.publisher University of Helsinki en
dc.relation.isformatof URN:ISBN:ISBN 978-951-51-3906-1 fi
dc.relation.isformatof Helsinki: Unigrafia, 2017, Dissertationes Scholae Doctoralis Ad Sanitatem Investigandam Universitatis Helsinkiensis. ISSN 2342-3161 fi
dc.relation.ispartof URN:ISSN:ISSN 2342-317X fi
dc.rights Julkaisu on tekijänoikeussäännösten alainen. Teosta voi lukea ja tulostaa henkilökohtaista käyttöä varten. Käyttö kaupallisiin tarkoituksiin on kielletty. fi
dc.rights This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited. en
dc.rights Publikationen är skyddad av upphovsrätten. Den får läsas och skrivas ut för personligt bruk. Användning i kommersiellt syfte är förbjuden. sv
dc.subject fi
dc.title CHARACTERIZATION OF ANGPTL3 DEFICIENCY AND MOLECULAR MECHANISMS OF ANGPTL3 DEFICIENCY-INDUCED HYPOLIPIDEMIA en
dc.type.ontasot Väitöskirja (artikkeli) fi
dc.type.ontasot Doctoral dissertation (article-based) en
dc.type.ontasot Doktorsavhandling (sammanläggning) sv
dc.ths Jauhiainen, Matti fi
dc.opn Kersten, Sander fi
dc.type.dcmitype Text fi

Tiedostot

Latausmäärä yhteensä: Ladataan...

Tiedosto(t) Koko Formaatti Näytä
CHARACTE.pdf 1.338MB PDF Avaa tiedosto

Viite kuuluu kokoelmiin:

Näytä tavanomaiset kuvailutiedot